产品货号：
QN0886
中文名称：
通用基因组DNA提取试剂盒
英文名称：
Universal Genomic DNA Extraction Kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：室温，其中RNase A、蛋白酶K置于-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
附录参考：
DNA浓度及纯度检测（浓度较高时）：
得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/mL双链DNA、40μg/mL单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。
相关搜索：通用基因组DNA提取试剂盒，Universal Genomic DNA Extraction Kit
本试剂盒为通用型，适合于从土壤、粪便、昆虫或其他样本中提取基因组DNA。对细菌，真菌，昆虫等样本都具有很好的裂解效果，最大限度的保留了生物DNA的多态性。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
产品组成：
| 组分 | 50T | 100T |
| RNase A | 100μL | 100μL×2 |
| 蛋白酶K | 1mL | 1mL×2 |
| 溶液A | 25mL | 50mL |
| 溶液B | 25mL | 50mL |
| 漂洗液 | 15mL | 15mL×2 |
| 洗脱液 | 15mL | 30mL |
| 吸附柱 | 50个 | 100个 |
| 收集管 | 50个 | 100个 |
保存：室温，其中RNase A、蛋白酶K置于-20℃，有效期1年。
注意事项：
- 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签（每瓶需单独加入45mL无水乙醇）。
- 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
- 由于样品不同，最终提取的DNA含量和纯度也有所不同，一般来说，如果所提取DNA用电泳的方法检测不到，PCR会有结果，样品尽可能的新鲜。否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
- 若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。
- 如果样品消化不彻底，后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况，可适当延长离心时间。
- 洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率；DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
使用方法：
- 样品处理：
- 土壤：称取0.1～0.3g (根据干湿)土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使土壤颗粒研成粉末，加500μL溶液A，振荡至彻底悬浮。
- 粪便：称取0.1～0.3g (根据干湿)粪便，加500μL溶液A，振荡至彻底悬浮。
- 昆虫：称取0.1～0.3g昆虫，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使昆虫研成粉末，加500μL溶液A，振荡至彻底悬浮。
- 未知样品：如为细未状，可直接称取0.1～0.3g(根据干湿)加500μL溶液A，如为块状，可0.1～0.3g用液氮研磨成粉未，再加500μL溶液A，振荡至彻底悬浮。
- 土壤：称取0.1～0.3g (根据干湿)土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使土壤颗粒研成粉末，加500μL溶液A，振荡至彻底悬浮。
- 向悬浮液中加入2μL RNase A，55℃放置10min。
- 加入20μL的蛋白酶K，充分混匀，55℃水浴消化，30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次，12000转离心10min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀，可再次离心。
- 加入500μL溶液B，充分混匀。如出现白色沉淀，于55℃放置5min，沉淀即会消失，不影响后续实验。如溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能导致提取的DNA量少及不纯，还有可能导致上柱后堵柱子，请增加消化时间。
- 加入500μL无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，放置2min (分两次加入，每次700μL)。
- 12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中9、12000rpm离心2min，将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
- 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50～200μL经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心2min。
- 离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的基因组DNA。
附录参考：
DNA浓度及纯度检测（浓度较高时）：
得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/mL双链DNA、40μg/mL单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。
相关搜索：通用基因组DNA提取试剂盒，Universal Genomic DNA Extraction Kit